紫外可见分光光度计的基本工作原理类似于红外光谱仪。一定频率的紫外可见光用于照射待分析的有机物质,引起分子中价电子的转变,其将被选择性地吸收。作为波长函数吸收的一组光谱反映了样品的特征。在紫外可见分光光度计范围内,对于特定波长,吸收程度与样品中组分的浓度成比例,因此可以定性分析测量的光谱,并且可以基于吸收和已知浓度来比较测量的光谱标准、定量分析。
紫外可见分光光度计的用途
1.检定物质
根据吸收光谱图上的一些特征吸收,特别是较大吸收波长λ-max和摩尔吸收系数ε是检定物质的常用物理参数。这在药物分析上就有着很广泛的应用。在药典中,已将众多的药物紫外吸收光谱的较大吸收波长和吸收系数载入其中,为药物分析提供了很好的手段。
2.与标准物及标准图谱对照
将分析样品和标准样品以相同浓度配制在同一溶剂中,在同一条件下分别测定紫外可见吸收光谱。若两者是同一物质,则两者的光谱图应*一致。如果没有标样,也可以和现成的标 准谱图对照进行比较。这种方法要求仪器准确,精密度高,且测定条件要相同。
3.比较较大吸收波长吸收系数的一致性
4.纯度检验
5.推测化合物的分子结构
6.氢键强度的测定
实验证明,不同的极性溶剂产生氢键的强度也不同,这可以利用紫外光谱来判断化合物在不同溶剂中氢键强度,以确定选择哪一种溶剂。
7.络合物组成及稳定常数的测定:
8.反应动力学研究
9.在有机分析中的应用
有机分析是一门研究有机化合物的分离、鉴别及组成结构测定的科学,它是在有机化学和分析化学的基础上发展起来的综合性学科。