紫外可见分光光度计的基本工作原理类似于红外光谱仪。一定频率的紫外可见光用于照射待分析的有机物质，引起分子中价电子的转变，其将被选择性地吸收。作为波长函数吸收的一组光谱反映了样品的特征。在紫外可见分光光度计范围内，对于特定波长，吸收程度与样品中组分的浓度成比例，因此可以定性分析测量的光谱，并且可以基于吸收和已知浓度来比较测量的光谱标准、定量分析。