紫外可见分光光度计是一种常用的实验室仪器,广泛应用于化学、生物、医学和环境等领域。本文将介绍紫外可见分光光度计的基本原理、构造和使用方法。
一、基本原理
利用样品吸收光的特性来测量其浓度的仪器。在紫外可见区域,不同物质对光的吸收程度不同。当样品通过光度计时,会通过一个具有单色性能的光源发出的一束光线照射到样品上,样品会吸收部分光线,使其透过样品的光线减少。这部分被吸收的光线量可以通过检测样品前后光线强度的变化来计算出来。由此可以推算出样品中某一特定物质的浓度。
二、构造
通常由以下三个部分组成:光源、单色器和检测器。
1.光源:该光度计中通常采用氘灯或钨灯作为光源。
2.单色器:单色器主要用来将光源发出的白光分离成一束具有单色性能的光线。单色器中通常采用光栅或棱镜作为分离机构,通过旋转单色器上的光栅或棱镜,可以选择一个特定的波长范围。
3.检测器:检测器用于测量样品前后光线强度的变化。常用的检测器包括光电二极管和光电倍增管等。这些检测器可以将光线转化为电信号,并将其发送到计算机或数显仪器上进行显示和记录。
三、使用紫外可见分光光度计需要注意以下几个方面:
1.样品的制备:样品需要被制备成透明均匀的溶液或悬浮液。如果样品是固体,则需要先将其溶解或悬浮于适当的溶剂中。
2.手动调节仪器:在进行实验之前,需要手动调节光源和单色器以选择适当的波长范围,并校正零点(即在没有样品的情况下测量背景光强度)。
3.放入样品:将制备好的样品倒入光路中,并根据需要选择适当的路径长度。
4.记录结果:记录样品前后的光线强度差值,并使用标准曲线或计算公式来计算样品中某一特定物质的浓度。