一个完整的固相萃取步骤涵盖固相萃取柱的预办理、上样、洗去干扰杂质洗脱及收集剖析物四个步骤[l]。操作步骤如图2-1所示。
(1)固相萃取柱的预办理
在萃取样品之前，吸附剂务必情节惬当的预办理，一足为了润湿和活化固相萃取填料，以使目标萃取物与固相外表紧急接触，易于发生分子间互动；二是为了破除填料中可能存在的杂质.减损污染。采取的办法是用一定量溶剂冲洗萃取柱。
反相类型的固相萃取硅胶和非极性吸附剂媒介，通常用水溶性有机溶剂如木醇预办理，木醇润湿吸附剂外表和渗透键台烷基相，易于水更管用地润湿硅胶外表。而后用水或缓冲溶液替换滞留在柱中的木醇，以使样品水溶液与吸附剂外表有优良的接触，增长萃取速率。正相类型的固相萃取硅胶和极性吸附剂媒介，通常用样品所在的有机溶剂来预办理。离子交换填料普通用3—5ml。去离子水或低浓度的离子缓冲溶液来预办理。
固相萃取填料从预办理到样品介入都应保持湿润，假如在样品介入之前，萃取柱中的填料于了，需要重复预办理过程。而且在从新引入有机溶剂之前，先要用水冲洗革取柱内缓冲溶液中的盐分。
(2)上样
将样品倒^活化后的SPE小柱，而后利用加压、抽真空或离心的办法使样品步入吸附剂(如图2—2所示)。采取手动或泵以正压推动或负压抽吸形式，使液体样品以惬当流速经过固相萃取柱，此时，样品中的日标萃取物被吸附在固相萃取柱填料上。
(3)洗击干扰杂质
荡涤的目标是为r破除吸附在固相萃取柱上的小量基体下扰组分。普通取舍
中常强度的混合溶剂，尽可能破除基体中的干扰组分，又不会以致目标萃取物流失。如反相萃取体系常选用一定比例组成的有机溶剂水混合液，有机溶剂比例应大于样品溶液而小于洗脱剂溶液。
(4洗脱及收集剖析物
取舍惬当的洗脱溶剂洗脱被剖析物，收集洗脱液，挥干溶剂以备后用或直接施行在线剖析。为了尽可能将剖析物洗脱，使比剖析物吸附更强的杂质留在SPE柱上，需要取舍强度合宜的洗脱溶剂。
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